Multiplex IHC: Como técnicas de coloração múltipla estão revolucionando a patologia

No diagnóstico histopatológico tradicional, cada lâmina costuma ser marcada com um ou dois anticorpos para detectar proteínas específicas. Mas o avanço tecnológico tornou possível aplicar multiplex immunohistochemistry (mIHC) — coloração múltipla em uma única lâmina — ampliando a profundidade da análise sem consumir tantas amostras. Esse método já é foco de estudos recentes e está ganhando espaço em laboratórios de pesquisa e clínicas especializadas. Biblioteca Online Wiley+1

O que é mIHC e por que é importante?

• Definição: mIHC permite a marcação simultânea de múltiplos biomarcadores em uma única seção de tecido, usando diferentes anticorpos correlacionados a fluorocromos ou métodos cromogênicos multicanais. PubMed+2ScienceDirect+2
• Benefícios principais:
  1. Economia de material – requer menos lâminas/tecido, o que é valioso quando o material é escasso.
  2. Informação espacial – preserva o contexto tecidual, ou seja, onde cada célula está localizada em relação às outras.
  3. Multiplicidade de dados – permite comparar múltiplos marcadores numa mesma amostra, o que enriquece os resultados diagnósticos e pesquisas.
  4. Integração com imagens e análise digital – muitas implementações de mIHC já contam com softwares de quantificação e análise espacial. PubMed+2Biblioteca Online Wiley+2

Desafios e cuidados técnicos

• É necessário validação rigorosa de anticorpos: cruzamentos entre reagentes podem gerar ruído ou falso-positivos. Biblioteca Online Wiley+1
• Equilíbrio entre intensidade de cor e interferência entre marcadores: ajustar concentrações, tempos de incubação e etapas de remoção entre ciclos pode ser crítico.
• Limitações de equipamento: nem todos os microscópios ou sistemas de imagem suportam múltiplas cores ou filtros espectrais.
• Padronização é chave: muitos estudos destacam que protocolos heterogêneos dificultam replicabilidade entre laboratórios. BMJ JITC+2ScienceDirect+2

Como laboratórios podem começar a aplicar mIHC

1. Iniciar com painéis pequenos (2–4 marcadores) antes de expandir.
2. Validar cada anticorpo individualmente
3. Utilizar kits e reagentes padronizados (se possível)
4. Incorporar software de análise de imagem para quantificação e visualização espacial
5. Documentar todos os parâmetros de protocolo (tempos, temperaturas, diluições) para reprodutibilidade

Conclusão

A técnica multiplex IHC representa um passo importante na evolução da patologia, unindo profundidade analítica, economia de amostra e valor agregado. Para laboratórios que buscam inovação, já é uma ferramenta que merece atenção e testes — especialmente em pesquisas ou casos que demandam múltiplos marcadores.Laboratórios que buscam segurança e organização encontram na HodayaBox uma ferramenta essencial para o dia a dia.